自動(dòng)細(xì)胞計(jì)數(shù)儀法采用體細(xì)胞自動(dòng)計(jì)數(shù)儀,設(shè)置有兩個(gè)電極并設(shè)定脈沖的臨界水平,當(dāng)牛乳體細(xì)胞通過(guò)電極狹縫時(shí)會(huì)改變液體的電導(dǎo)性從而產(chǎn)生電脈沖,高過(guò)臨界水平而被記錄下來(lái),從而計(jì)算出牛乳的體細(xì)胞數(shù)量。但此方法需要加入固定試劑甲醛,并需要培養(yǎng)10多個(gè)小時(shí)的試劑,前期處理麻煩且費(fèi)時(shí)。
體細(xì)胞數(shù)(SomaticCellCount,SCC)指的是每毫升牛乳中的細(xì)胞總數(shù)。體細(xì)胞中大部分是白細(xì)胞(即淋巴細(xì)胞、嗜中性白細(xì)胞和巨噬細(xì)胞),大約占總數(shù)的98%~99%,剩余1%~2%的體細(xì)胞是乳腺組織上脫落的上皮細(xì)胞。
乳業(yè)發(fā)達(dá)國(guó)家把牛乳體細(xì)胞數(shù)量作為新鮮牛奶的收購(gòu)標(biāo)準(zhǔn)之一,其體細(xì)胞數(shù)的測(cè)定已經(jīng)成為一種日常工作。牛乳體細(xì)胞數(shù)的檢測(cè)方法主要包括以下幾種:
一、體細(xì)胞計(jì)數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)方法
體細(xì)胞計(jì)數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)方法是最早期的檢測(cè)方法,采用顯微鏡檢測(cè),通過(guò)把牛奶涂抹于計(jì)數(shù)板中干燥,染色再干燥,清洗再干燥后,在顯微鏡下觀(guān)察,人工計(jì)數(shù)并折算每毫升牛乳的體細(xì)胞數(shù)。此方法準(zhǔn)確性高,可用作其他快速檢測(cè)方法的校準(zhǔn)方法,但該方法制作過(guò)程繁瑣,需要的時(shí)間較多,不適合在奶廠(chǎng)進(jìn)行現(xiàn)場(chǎng)實(shí)時(shí)檢測(cè)。
二、熒光顯微計(jì)數(shù)法
熒光顯微計(jì)數(shù)法與牛乳體細(xì)胞計(jì)數(shù)的標(biāo)準(zhǔn)方法大致相同,其改進(jìn)為對(duì)體細(xì)胞進(jìn)行熒光染色,通過(guò)熒光顯微鏡進(jìn)行檢測(cè),省去了多次干燥環(huán)節(jié),但此方法依然費(fèi)時(shí)費(fèi)力。
三、CMT法
CMT方法屬于化學(xué)方法,采用化學(xué)試劑破壞牛乳的體細(xì)胞,使其釋放出DNA而產(chǎn)生沉淀或凝塊,觀(guān)察沉淀的多少可以間接判斷出體細(xì)胞數(shù)的相對(duì)值。此方法是憑經(jīng)驗(yàn)得到體細(xì)胞數(shù)的大致范圍,不能得到具體數(shù)值。
四、自動(dòng)體細(xì)胞計(jì)數(shù)儀法
自動(dòng)體細(xì)胞計(jì)數(shù)儀法采用體細(xì)胞自動(dòng)計(jì)數(shù)儀,設(shè)置有兩個(gè)電極并設(shè)定脈沖的臨界水平,當(dāng)牛乳體細(xì)胞通過(guò)電極狹縫時(shí)會(huì)改變液體的電導(dǎo)性從而產(chǎn)生電脈沖,高過(guò)臨界水平而被記錄下來(lái),從而計(jì)算出牛乳的體細(xì)胞數(shù)量。但此方法需要加入固定試劑甲醛,并需要培養(yǎng)10多個(gè)小時(shí)的試劑,前期處理麻煩且費(fèi)時(shí)。
流式細(xì)胞計(jì)數(shù)法是自動(dòng)體細(xì)胞計(jì)數(shù)儀法的衍生,其測(cè)定原理是用熒光染色劑對(duì)體細(xì)胞進(jìn)行染色,染色后的細(xì)胞在激勵(lì)光源的刺激下發(fā)射熒光信號(hào),而儀器可將光信號(hào)轉(zhuǎn)化為電信號(hào),強(qiáng)迫細(xì)胞一個(gè)一個(gè)地通過(guò)縫隙管道并記錄細(xì)胞個(gè)數(shù)。此方法在現(xiàn)有的各國(guó)先進(jìn)細(xì)胞分析儀中使用,檢測(cè)速度迅速但準(zhǔn)確度不能保證,且價(jià)格普遍昂貴,用于大型衛(wèi)生檢測(cè)中心較多,而不具有普及到普通奶場(chǎng)的條件。