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waters色譜柱供應(yīng)商講解色譜柱常見(jiàn)毛病
1.柱壓過(guò)高
為什么柱壓會(huì)過(guò)高?
1)微粒堵塞(樣品、流動(dòng)相、密封墊)
2)柱床膨脹
3)不可逆吸附
4)細(xì)菌生長(zhǎng)
2.柱效低
為什么柱效低?
1)色譜柱被污染
2)過(guò)濾片部分堵塞(樣品、流動(dòng)相或密封墊的細(xì)小顆粒造成的堵塞)
3)色譜柱內(nèi)的死體積
3.色譜柱維修/再生——物理阻塞
1)在安裝柱前后測(cè)試壓力差
2)如果柱壓太高,反裝色譜柱,并用10-20倍體積的流動(dòng)相沖洗色譜柱,監(jiān)測(cè)壓力變化
3)若出現(xiàn)襯墊(如:蛋白凝聚、細(xì)胞物、聚合物)設(shè)法用相應(yīng)的可溶性溶劑
4)若仍無(wú)效,應(yīng)考慮更換濾片
5)柱頭有塌陷,用填料修補(bǔ)
4.實(shí)驗(yàn)的重復(fù)性差
1)色譜柱被污染
2)流動(dòng)相pH值及組成不合適造成鍵合相流失
3)樣品溶劑不同或樣品本身不穩(wěn)定
5.回收率低,不出峰
1)“不可逆”吸附
2)固定相過(guò)強(qiáng)或流動(dòng)相過(guò)弱
3)非特異性吸附
6.色譜柱以外的因素
1)“柱效”問(wèn)題,不一定是色譜柱問(wèn)題
2)儀器問(wèn)題:連接不好造成死體積
3)流動(dòng)相問(wèn)題:色譜柱未平衡好
4)進(jìn)樣量太大
5)不同公司產(chǎn)品,其接頭不同。處理不當(dāng)時(shí),會(huì)造成:色譜峰展寬(死體積)使柱效下降或滲漏。解決方法:自制相應(yīng)的轉(zhuǎn)換接頭;使用“通用型”接頭(椎箍及螺母)
6)系統(tǒng)反壓?jiǎn)栴}:
阻尼器堵塞
進(jìn)樣器堵塞
管路或連接口堵塞
在線過(guò)濾器不干凈
保護(hù)柱
7)壓力傳感器不準(zhǔn)確
8)流速是否錯(cuò)誤